Определение ДНК уреаплазм (Ureaplasma urealiticum) в отделяемом слизистых методом ПЦР, количественное исследование

Определение ДНК уреаплазм (Ureaplasma urealiticum) в отделяемом слизистых методом ПЦР, количественное исследование

Описание

Уреаплазмы — это группа грамотрицательных бактерий, которые относятся к виду микоплазм, покрытых трехслойной цитоплазматической мембраной и не имеющих плотной клеточной стенки, именно поэтому они устойчивы к пенициллину и другим антибактериальным препаратам, блокирующим синтез клеточной стенки. Название «уреаплазмы» происходит от способности этого вида микоплазм синтезировать фермент уреазу, расщепляющий мочевину с образованием углекислого газа и аммиака. 

Ureaplasma urealiticum является частью популяции бактерий в организме и обитает в нем в равновесии с другими микроорганизмами, в большинстве случаев не вызывая проблем. Здоровая иммунная система способна подавлять рост данных микроорганизмов. Уреаплазма присутствует у многих людей, при этом они даже не подозревают об этом. Передача уреаплазмы осуществляется половым путем при незащищенном половом контакте, а также в родах от матери к ребенку. 

Равновесие может быть нарушено вследствие несоблюдения гигиены урогенитального тракта, снижения иммунитета, изменений гормонального фона, тяжелых заболеваний. В таком случае наблюдается рост численности уреаплазм. Возникает дисбаланс между нормальной и условно-патогенной микрофлорой, к которой относится уреаплазма.

Уреаплазмоз у женщины может стать причиной выкидышей или преждевременных родов. Характерными заболеваниями для женщин, где присутствуют уреаплазмы, являются вагинит (воспаление слизистой оболочки влагалища), эндометрит (воспаление внутреннего слоя матки), цервицит (воспаление шейки матки), аднексит (воспаление придатков матки).

Уреаплазмоз у мужчины может привести к эректильной дисфункции и стать возможной причиной бесплодия. Характерными проявлениями уреаплазмоза являются уретрит, простатит, цистит, орхит.

После попадания Ureaplasma urealiticum в организм образуются защитные молекулы - антитела. Существует несколько классов антител: IgА, IgМ, IgG, IgM синтезируются уже на первой неделе заболевания и служат показателем острой инфекции, тогда как IgG — позже и отражает хронический процесс.

Информация об инфицировании человека может быть получена с помощью метода ПЦР.
Определение ДНК Ureaplasma urealiticum в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени». 

Если результат качественного исследования отделяемого слизистых оболочек на определение ДНК уреаплазм оказался положительным, необходимо проведение количественного анализа, позволяющего установить конкретную концентрацию Ureaplasma urealiticum. 

Анализ на обнаружение антител класса G (IgG) к уреаплазме назначают при подозрении на инфекцию Ureaplasma urealyticum (в динамике, в парных сыворотках, параллельно с определением IgG, а также микробиологическим или ПЦР-тестированием). Данное исследование является обязательным перед назначением медикаментозной терапии. Это обусловлено необходимостью мониторинга динамики развития уреаплазменной инфекции и контроля результативности проведенной терапии. 

Примечание: При урогенитальной патологии выявление антител не информативно в силу низкой иммуногенной активности уреаплазмы. Выявление антител актуально для экстрагенитальных форм инфекции.



  • Тип биоматериала:

    МАЗОК, СОСКОБ

  • Тип пробирки, цвет крышки:

    Эппендорф с транспортной средой

Подготовка

· Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных препаратов, либо прекратить приём за 7-10 дней.

Мужчинам:

  • В течение 2 недель до исследования исключить местное применение антисептиков и/или антибактериальных и противогрибковых препаратов;

  • В течение 3 часов до исследования удержаться от мочеиспусканий, не проводить туалет наружных половых органов;

  • Воздержаться от половых контактов и мастурбации в течение 2-3 суток.

Женщинам:

  • Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла, не ранее 5 –ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации;

  • При наличии патологических изменений, взятие материала проводится в день обращения;

  • За 3 дня до обследования не следует проводить спринцевание, туалет наружных половых органов с применением средств интимной гигиены, не применять вагинальные препараты (кремы, свечи);

  • Материал берется до проведения мануального и УЗИ исследования, кольпоскопии;

  • Воздержаться от половых контактов на 1-2 суток;

  • Если для исследования берут соскоб из уретры, сбор материала проводят до или не ранее 2 - 3 часов после мочеиспускания.

Что означают результаты теста

При отсутствии ДНК уреаплазм (Ureaplasma urealiticum) в отделяемом слизистых методом ПЦР выдается результат «отрицательно/не обнаружено». 

В случае обнаружения ДНК уреаплазм (Ureaplasma urealiticum) в отделяемом слизистых методом ПЦР выдается результат «положительно/обнаружено».

В результате указывается количество копий ДНК (копий/мл). 

Положительный результат анализа на количественное определение ДНК уреаплазм (Ureaplasma urealiticum) в отделяемом слизистых методом ПЦР:

  • В анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для Ureaplasma urealyticum, в концентрации более или менее 104 копий в пробе: инфицирование Ureaplasma urealyticum;

Отрицательный результат анализа на количестенное определение ДНК уреаплазм (Ureaplasma urealiticum) в отделяемом слизистых методом ПЦР:

  • В анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для Ureaplasma urealyticum, или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.